顯微鏡的放大倍數(shù)的選擇
顯微鏡包括兩組透鏡——物鏡和目鏡。顯微鏡的的放大倍數(shù)主要通過(guò)物鏡來(lái)保證,物鏡的最高放大倍數(shù)可達(dá)100倍,目鏡的放大倍數(shù)可達(dá)25倍。
物鏡的放大倍數(shù)可由下式得出:
M物=L/F1
式中:L——顯微鏡的光學(xué)筒長(zhǎng)度(即物鏡后焦點(diǎn)與目鏡前焦點(diǎn)的距離);
F1——物鏡焦距。
而A′B′再經(jīng)目鏡放大后的放大倍數(shù)則可由以下公式計(jì)算:
M目=D/F2
式中:D——人眼明視距離(250mm);
F2——目鏡焦距。
顯微鏡的總放大倍數(shù)應(yīng)為物鏡與目鏡放大倍數(shù)的乘積,即:
M總=M物×M目=250L/F1*F2
在使用中如選用另一臺(tái)顯微鏡的物鏡時(shí),其機(jī)械鏡筒長(zhǎng)度必須相同,這時(shí)倍數(shù)才有效。否則,顯微鏡的放大倍數(shù)應(yīng)予以修正,應(yīng)為:
M=M物×M目×C
式中:C——為修正系數(shù)。修正系數(shù)可用物鏡測(cè)微尺和目鏡測(cè)微尺度量出來(lái)。
放大倍數(shù)用符號(hào)“×”表示,例如物鏡的放大倍數(shù)為25×,目鏡的放大倍數(shù)為10×,則顯微鏡的放大倍數(shù)為25×10=250×。放大倍數(shù)均分別標(biāo)注在物鏡與目鏡的鏡筒上。
在使用顯微鏡觀察物體時(shí),應(yīng)根據(jù)其組織的粗細(xì)情況,選擇適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。以細(xì)節(jié)部分觀察得清晰為準(zhǔn),盲目追求過(guò)高的放大倍數(shù),會(huì)帶來(lái)許多缺陷。因?yàn)榉糯蟊稊?shù)與透鏡的焦距有關(guān),放大倍數(shù)越大,焦距必須越小,同時(shí)所看到物體的區(qū)域也越小。
需要注意的是有效放大倍數(shù)問(wèn)題。物鏡的數(shù)值孔徑?jīng)Q定了顯微鏡有效放大倍數(shù)。有效放大倍數(shù),就是人眼能夠分辨的“人眼鑒別率”d′與物鏡的鑒別率d間的比值,即不使人眼看到假像的最小放大倍數(shù):
M=d′/d=2d′NA/λ
人眼鑒別率d′一般在0.15~0.30mm之間,若分別用d′=0.15mm和d′=0.30mm代入上式:
Mmin=2´0.15(NA)/5500´10-7=500(NA)
Mmax=2´0.30(NA)/5500´10-7=1000(NA)
Mmin~Mmax之間的放大倍數(shù)范圍就是顯微鏡的有效放大倍數(shù)。
對(duì)于顯微鏡相時(shí)的有效放大倍數(shù)的估算,則應(yīng)將人眼的分辨能力d′用底片的分辨能力d″代替。一般底片的分辨能力d″約為0.030mm左右,所以照相時(shí)的有效放大倍數(shù)M′為:
M′= d″/d=2d″(NA)/λ=2×0.030(NA) /5500×10-7=120(NA)
如果考慮到由底片印出相片,人眼觀察相片時(shí)的分辨能力為0.15mm,則M′應(yīng)改為M″:
M″=2*0.15(N*A)/5500´10-7=500(NA)
所以照相時(shí)的有效放大倍數(shù)在M′~M″之間,它比觀察時(shí)的有效放大倍數(shù)小。這就是說(shuō),如果用45×/0.63的物鏡照相,那么它的最大有效放大倍數(shù)為500×0.63=300倍左右,所選用的照相目鏡應(yīng)為300/45=6~7倍,放大倍數(shù)應(yīng)在300倍以下。這比觀察的最大有效放大倍數(shù)(630倍)要小。