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多重PCR

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
一般PCR僅應(yīng)用一對(duì)引物,通過(guò)PCR擴(kuò)增產(chǎn)生一個(gè)核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR,它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對(duì)以上引物,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng),其反應(yīng)原理,反應(yīng)試劑和操作過(guò)程與一般PCR相同.
多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時(shí)加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時(shí)檢測(cè)多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,,可系統(tǒng)組合的有:①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者體內(nèi),有時(shí)存在多種肝炎病毒重疊感染,有時(shí)是甲乙丙型肝炎病毒重疊;有時(shí)可能是甲乙型肝炎病毒重疊;有時(shí)是乙丙型肝炎病毒重疊.②腸道致病性細(xì)菌的檢測(cè),如傷寒,痢疾和霍亂,有時(shí)具有較相同的腸道癥狀,有時(shí)痢疾霍亂同存一病人并同時(shí)發(fā)病.③性病的檢測(cè),如梅毒,淋病及艾滋病的診斷.④戰(zhàn)傷細(xì)菌及生物戰(zhàn)劑細(xì)菌的檢測(cè),如破傷風(fēng)桿菌,產(chǎn)氣莢膜桿菌,炭疽桿菌,鼠疫桿菌等偵檢.⑤需特殊培養(yǎng)的無(wú)芽胞厭氧菌,如脆弱類(lèi)桿菌、艱難桿菌的鑒定等.
  某些病原微生物,某些遺傳病或癌基因,型別較多,或突變或缺失存在多個(gè)好發(fā)部位,多重PCR可提高其檢出率并同時(shí)鑒定其型別及突變等可系統(tǒng)應(yīng)用的有:乙型肝炎病毒的分型;乳頭瘤病毒的分型;單純皰疹病毒的分型;杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良癥的分型及癌基因的檢測(cè)等.
  多重PCR的特點(diǎn)有:①高效性,在同一PCR反應(yīng)管內(nèi)同時(shí)檢出多種病原微生物,或?qū)τ卸鄠(gè)型別的目的基因進(jìn)行分型,特別是用一滴血就可檢測(cè)多種病原體.②系統(tǒng)性,多重PCR很適宜于成組病原體的檢測(cè),如肝炎病毒,腸道致病性細(xì)菌,性病,無(wú)芽胞厭氧菌,戰(zhàn)傷感染細(xì)菌及細(xì)菌戰(zhàn)劑的同時(shí)偵檢.③經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便性,多種病原體在同一反應(yīng)管內(nèi)同時(shí)檢出,將大大的節(jié)省時(shí)間,節(jié)省試劑,節(jié)約經(jīng)費(fèi)開(kāi)支,為臨床提供更多更準(zhǔn)確的診斷信息.
 
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