手機(jī)版
| 產(chǎn)品索引 | 5859 |
| 中文名稱： | 血液DNA提取試劑盒 |
| 英文名稱： | 血液DNAout |
| 產(chǎn)品編號： | 3671 |
|
產(chǎn)品類別： |
分子生物學(xué) |
| 生產(chǎn)廠家： | 國產(chǎn) |
| 產(chǎn)品價格： | 90元 |
| 產(chǎn)品規(guī)格： | 10 次（簡裝） |
產(chǎn)品介紹：
本產(chǎn)品用于提取新鮮或冷凍的動物(包括禽類)及人抗凝全血基因組DNA。
性能指標(biāo)：
1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質(zhì)和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。DNA產(chǎn)量為30-50 ml/mL全血。
2.操作簡單,整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理。血液處理量可達(dá)1 mL,不需要柱子,不會發(fā)生其他同類產(chǎn)品經(jīng)常發(fā)生的堵塞現(xiàn)象。
3.價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格只有其一半左右。
4.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
使用方法：
將20-200 mg克剪碎的組織或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暫勻漿，65℃保溫5分鐘后15000 g離心1分鐘，上清尤氳忍寤?芤?SPAN lang=EN-US>B混勻, 冰浴2分鐘,15000 g離心1分鐘，上清加入等體積的氯仿(自備)混勻后15000 g離心5分鐘,最后用等體積異丙醇沉淀上清得到DNA沉淀，用1 ml 75%乙醇(自備)清洗2次后將沉淀溶于緩沖液中待用。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
圖一:血液DNAOUT效果圖
 |
 |
 |
|
圖注：用本產(chǎn)品提取1 ml兔全血(左圖)和0.1 ml抗凝雞全血(抗凝劑:血液=1:1)得到的DNA（中圖）,得到的DNA分別溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上樣,在0.8%瓊脂糖凝膠和1 X SuperBuffer中300 V電泳10分鐘后直接在UV燈下照相。M為全長l 嗜菌體DNA。按國內(nèi)某試劑盒提取方法提取0.2 ml雞血,柱子在離心后被堵, 實(shí)驗(yàn)失敗(右圖)。
|
表一: 血液DNAOUT與國內(nèi)某試劑盒提取血液DNA數(shù)據(jù)比較
|
|
260/280
|
產(chǎn)率
|
|
兔全血
|
1.61（3）
|
16.58（3）
|
|
雞全血
|
1.82（3）
|
626.8（3）
|
|
鴨全血
|
1.83（3）
|
948.71（3）
|
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品：
微量DNA助沉劑DNAdown
非凍型DNA組織保存液:DNALOCKER
超快DNA電泳緩沖液:SuperBuffer
血液DNAOUT 提取試劑盒使用說明
一: 血液DNAOUT 提取試劑盒簡介
適用對象 新鮮或冷凍的動物及人抗凝全血基因組DNA的提取。
作用原理 所含去污劑裂解細(xì)胞并釋放出DNA,所含DNase抑制劑能抑制DNase的活性,所含去蛋白劑能清除血液細(xì)胞中所含的蛋白質(zhì)成份。所含RNase能去除RNA的污染。
試劑盒成份 “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。
性能指標(biāo) DNA產(chǎn)量與國內(nèi)同類產(chǎn)品相當(dāng)。
使用優(yōu)點(diǎn) 操作簡單 整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理。
DNA純凈 獲得的DNA純度高，可直接用于PCR、酶切、雜交等。
價廉物美 與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng)，但價格便宜一半左右。
安全無毒 本試劑盒對人體無毒，無腐蝕性和刺激性氣味。
物理特性 2-8℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑 氯仿,異丙醇，75%乙醇。
二: 血液DNAOUT的使用
1． 在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”（冷凍血需先37℃水浴融化），吹打混勻。
2． 室溫離心15000rpm，2分鐘，沉淀呈紅色。小心傾去上清。
3． 再加入1ml“溶液A”，輕柔的吹打混勻，使細(xì)胞完全分散。
4． 室溫離心15000rpm, 2分鐘，沉淀呈粉白色。傾去上清。
5． 加入0.6ml“溶液B”（用前搖勻），用1ml吸頭徹底吹打混勻。
6． 68℃水浴10分鐘（此步可省略，但產(chǎn)量略有降低）。
7． 加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”，立即小心的顛倒混勻。
8． 室溫離心15000rpm,3分鐘，小心將上清（約0.7ml）轉(zhuǎn)移至一新的離心管中，加入等體積異丙醇，輕柔的顛倒混勻5-8次，此時出現(xiàn)絮狀DNA沉淀。
9． 室溫離心15000rpm，1分鐘，去盡上清。
10． 加入75%乙醇洗滌沉淀，室溫離心15000rpm，1分鐘。
11． 重復(fù)步驟10。
12． 室溫干燥DNA沉淀10分鐘，加入TE緩沖液0.1-0.3ml。65℃水浴10分鐘溶解DNA，中速振蕩5秒混勻。
