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3M細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片操作以及判讀
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一、測(cè)試細(xì)菌總數(shù) 操作方法
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 1、未開(kāi)封時(shí)，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期內(nèi)用完，高溫度時(shí)，凝固水可以排除，包裝物最好于室溫啟開(kāi)。 |
 2、已開(kāi)封的，將封口以膠帶封緊。 |
 3、保存再封的袋于≤25℃（≤77℉）和溫度<50％，不要冷藏已開(kāi)啟的包裝袋，并于一個(gè)月內(nèi)使用完。 |
 4、制備1：10和更大稀釋的食物樣品稀釋液，0稱取或吸取食物樣品，置入適宜的無(wú)菌容器內(nèi)，如均質(zhì)袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內(nèi). |
 5、加入適量的無(wú)菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調(diào)PH7.2) 、0.1%的蛋白膠水(ISO方法6887) 、緩沖蛋白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水. 不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液. 因?yàn)樗鼈兡芤种咕L(zhǎng)。 |
 6、攪拌或均質(zhì)樣品。樣品的稀釋液調(diào)PH6.5－7.2 對(duì)酸性樣品的稀釋液用IN NaOH |
 7、將測(cè)試片置于平坦表面處，揭開(kāi)上層膜。 |
 8、使用吸管將1mL樣液垂直滴加在測(cè)試片的中央處。 |
 9、允許使用上層膜直接落下，切勿向下滾動(dòng)上層膜。 |
 10、使用壓板隆起面底朝下，放置在上層膜中央處。 |
 11、輕輕的壓下，使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上，切勿扭轉(zhuǎn)壓板。 |
 12、拿起壓板，靜置至少1分鐘以使培養(yǎng)基凝固。 |
 13、測(cè)試片的透明面朝上，可堆疊至20片，對(duì)有一定濕度養(yǎng)箱能保持最少份損失是需要的。 |
 14、可目視及用標(biāo)準(zhǔn)菌落計(jì)數(shù)器或其它的照明放大鏡計(jì)數(shù)，并可參考判讀卡計(jì)算菌落數(shù)。 |
 15、可以分離菌落作進(jìn)一步鑒定，即掀起上層膜，由培養(yǎng)膠上挑取單個(gè)菌落。 |
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| 二、測(cè)試細(xì)菌總數(shù) 判讀方法 | |
 Aerobic bacteria count=152測(cè)試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計(jì)算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計(jì)算之). |
 Count=0在petrifilm AC測(cè)試片上,很容易解釋,圖2測(cè)試片上沒(méi)有任何菌落生長(zhǎng). |
 Count=16圖3示有不多的菌落. |
 Count=143Petrifilm AC測(cè)試片菌落數(shù)適宜計(jì)數(shù)范圍是25-250,見(jiàn)圖4 |
 Count=560測(cè)試片面積約為20cm2,當(dāng)菌落數(shù)超過(guò)250個(gè),如圖5所示,為了估計(jì)菌落數(shù),可選擇其中一個(gè)或數(shù)個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2),計(jì)算平均菌落數(shù),再乘以20可得到整個(gè)測(cè)試片上的菌落數(shù) |
 Count=tntc(estimated count=103)圖6所示petrifilm AC測(cè)試片上菌落太多而無(wú)法計(jì)數(shù)(tntc) |
 count=tntc(Estimated count=105) 有很多高數(shù)量菌落,使整個(gè)生長(zhǎng)區(qū)變粉色,如圖7所示,你僅可在生長(zhǎng)區(qū)邊緣現(xiàn)觀察到單個(gè)菌落,應(yīng)計(jì)錄為菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)(TNTC) |
 count=tntc(Estimated count=103)有時(shí)菌落分布出現(xiàn)不均衡,如圖8所示,這也記錄為TNTC. |
 Count=tntc(Estimated count=107)在圖9中petrifilm AC測(cè)試片上的菌落,最先粗略一看是可計(jì)數(shù)的,然而,你密切注意到生長(zhǎng)區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應(yīng)記錄為TNTC |
 Estimated count=160很少數(shù)菌種會(huì)液化petrifilm AC測(cè)試片上的培養(yǎng)基,如圖10所示.若有這種現(xiàn)象發(fā)生,可選擇沒(méi)有液化區(qū)的幾個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2),計(jì)算平均菌落數(shù).不要計(jì)數(shù)液化區(qū)內(nèi)的紅點(diǎn). |
 Count=83因?yàn)樵趐etrifilm AC測(cè)試片上菌落是紅色的,你會(huì)和不透明的不規(guī)則形狀的事物顆粒區(qū)分開(kāi),見(jiàn)圓圈1和2. |
