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紫外-可見(jiàn)分光光度法是在190～800nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定物質(zhì)的吸光度，用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測(cè)定的方法。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面，用來(lái)進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。因?yàn)閮x器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等，所以其最常見(jiàn)故障也分為光源和信號(hào)部分，小編對(duì)其進(jìn)行了整理，來(lái)一起學(xué)習(xí)吧！
光源部分
1、故障：氘燈不亮
原因：氘燈壽命到期(此種原因幾率最高)。
檢查：燈絲電壓、陽(yáng)極電壓均有，燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅)。
處置：更換氘燈。
2、故障：鎢燈不亮
原因：鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率最高)。
檢查：鎢燈兩端有工作電壓，但燈不亮；取下鎢燈用萬(wàn)用表電阻檔檢測(cè)。
處置：更換新鎢燈。
3、故障：鎢燈不亮
原因：沒(méi)有點(diǎn)燈電壓。
檢查：保險(xiǎn)絲被熔斷。
處置：更換保險(xiǎn)絲，如更換后再次燒斷則要檢查供電電路。
4、故障：氘燈不亮
原因：氘燈起輝電路故障。
檢查：氘燈在起輝的過(guò)程中，一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘，然后燈的陽(yáng)極與陰極間才可起輝放電，如果燈在起輝的開(kāi)始瞬間燈內(nèi)閃動(dòng)一下或連續(xù)閃動(dòng)，并且更換新的氘燈后依然如此，有可能是起輝電路有故障，燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率最大。
處置：需要專(zhuān)業(yè)人士修理。
信號(hào)部分
1、故障：吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(最常見(jiàn))
原因：沒(méi)做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
檢查：將參比液與樣品液調(diào)換位置便知。
處置：做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
2、故障：基線(xiàn)噪聲大
具體表示：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，全波長(zhǎng)范圍內(nèi)基線(xiàn)噪聲大
原因：光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品。
檢查：觀察光源是否照射到入射狹縫的中央？石英窗上有無(wú)污染物？
處置：重新調(diào)整光源鏡的位置，用乙醇清洗石英窗。
3、故障：信號(hào)的分辨率不夠
具體表現(xiàn)是：本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀察到；
原因：狹縫設(shè)置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快，造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上，從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào)；按常理，一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度；或者狹縫設(shè)置得過(guò)寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
檢查：放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄；
處置：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)最優(yōu)化的條件；
4、故障：紫外區(qū)的基線(xiàn)噪聲大
具體表現(xiàn)：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，僅僅是紫外區(qū)的基線(xiàn)噪聲大。
原因：氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物。
檢查：可見(jiàn)區(qū)的基線(xiàn)較為平坦，斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋，肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面；如果光學(xué)系統(tǒng)正常，最大的可能是氘燈老化，可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判斷。
處置：更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意：此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗(yàn)者來(lái)實(shí)施)；清洗比色皿，更換空白溶液；
5、故障：樣品出峰位置不對(duì)
原因：波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移。
檢查：通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線(xiàn)來(lái)判斷波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確。
處置：對(duì)于高檔儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可；而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器，這種調(diào)整則需要專(zhuān)業(yè)人員來(lái)進(jìn)行了。
6、故障：樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致；在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上。
檢查：更換一種穩(wěn)定的試樣判定。
處置：采取正確的試樣配置手段；修理推拉式樣品架的定位碰珠。
7、故障：沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出
原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi)。
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm，狹縫盡量開(kāi)到最寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀察白紙上有無(wú)綠光斑影像。
處置：檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位，雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了(耳朵可以聽(tīng)見(jiàn)電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音)。
8、故障：長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿(mǎn)屏大噪聲
具體表現(xiàn)：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿(mǎn)屏大噪聲
原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚。
檢查：重新開(kāi)機(jī)有可能回復(fù)，或打開(kāi)單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查(注意：打開(kāi)單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激)。
處置：更換飼服電機(jī)；
9、故障：吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)
具體表現(xiàn)：當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器。
原因：開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良。
檢查：用手加重力量按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化。
處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可。
10、故障：噪聲較大
具體原因：樣品室放入空白后做基線(xiàn)記憶，噪聲較大，紫外區(qū)尤甚。
原因：比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈，使放大器超出了校正范圍。
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零，然后將空比色皿插入樣品道一側(cè)，此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿；同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小。
處置：更換比色皿；更換空白液
紫外使用注意
1.使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2.取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3.供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4.測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以?xún)?nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，除另有規(guī)定外吸收度最大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以?xún)?nèi)。
5.供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以?xún)?nèi)。
6.選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。
文章（文字）來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)
光源部分
1、故障：氘燈不亮
原因：氘燈壽命到期(此種原因幾率最高)。
檢查：燈絲電壓、陽(yáng)極電壓均有，燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅)。
處置：更換氘燈。
2、故障：鎢燈不亮
原因：鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率最高)。
檢查：鎢燈兩端有工作電壓，但燈不亮；取下鎢燈用萬(wàn)用表電阻檔檢測(cè)。
處置：更換新鎢燈。
3、故障：鎢燈不亮
原因：沒(méi)有點(diǎn)燈電壓。
檢查：保險(xiǎn)絲被熔斷。
處置：更換保險(xiǎn)絲，如更換后再次燒斷則要檢查供電電路。
4、故障：氘燈不亮
原因：氘燈起輝電路故障。
檢查：氘燈在起輝的過(guò)程中，一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘，然后燈的陽(yáng)極與陰極間才可起輝放電，如果燈在起輝的開(kāi)始瞬間燈內(nèi)閃動(dòng)一下或連續(xù)閃動(dòng)，并且更換新的氘燈后依然如此，有可能是起輝電路有故障，燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率最大。
處置：需要專(zhuān)業(yè)人士修理。
信號(hào)部分
1、故障：吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(最常見(jiàn))
原因：沒(méi)做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
檢查：將參比液與樣品液調(diào)換位置便知。
處置：做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
2、故障：基線(xiàn)噪聲大
具體表示：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，全波長(zhǎng)范圍內(nèi)基線(xiàn)噪聲大
原因：光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品。
檢查：觀察光源是否照射到入射狹縫的中央？石英窗上有無(wú)污染物？
處置：重新調(diào)整光源鏡的位置，用乙醇清洗石英窗。
3、故障：信號(hào)的分辨率不夠
具體表現(xiàn)是：本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀察到；
原因：狹縫設(shè)置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快，造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上，從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào)；按常理，一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度；或者狹縫設(shè)置得過(guò)寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
檢查：放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄；
處置：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)最優(yōu)化的條件；
4、故障：紫外區(qū)的基線(xiàn)噪聲大
具體表現(xiàn)：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，僅僅是紫外區(qū)的基線(xiàn)噪聲大。
原因：氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物。
檢查：可見(jiàn)區(qū)的基線(xiàn)較為平坦，斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋，肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面；如果光學(xué)系統(tǒng)正常，最大的可能是氘燈老化，可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判斷。
處置：更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意：此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗(yàn)者來(lái)實(shí)施)；清洗比色皿，更換空白溶液；
5、故障：樣品出峰位置不對(duì)
原因：波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移。
檢查：通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線(xiàn)來(lái)判斷波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確。
處置：對(duì)于高檔儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可；而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器，這種調(diào)整則需要專(zhuān)業(yè)人員來(lái)進(jìn)行了。
6、故障：樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致；在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上。
檢查：更換一種穩(wěn)定的試樣判定。
處置：采取正確的試樣配置手段；修理推拉式樣品架的定位碰珠。
7、故障：沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出
原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi)。
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm，狹縫盡量開(kāi)到最寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀察白紙上有無(wú)綠光斑影像。
處置：檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位，雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了(耳朵可以聽(tīng)見(jiàn)電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音)。
8、故障：長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿(mǎn)屏大噪聲
具體表現(xiàn)：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿(mǎn)屏大噪聲
原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚。
檢查：重新開(kāi)機(jī)有可能回復(fù)，或打開(kāi)單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查(注意：打開(kāi)單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激)。
處置：更換飼服電機(jī)；
9、故障：吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)
具體表現(xiàn)：當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器。
原因：開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良。
檢查：用手加重力量按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化。
處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可。
10、故障：噪聲較大
具體原因：樣品室放入空白后做基線(xiàn)記憶，噪聲較大，紫外區(qū)尤甚。
原因：比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈，使放大器超出了校正范圍。
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零，然后將空比色皿插入樣品道一側(cè)，此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿；同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小。
處置：更換比色皿；更換空白液
紫外使用注意
1.使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2.取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3.供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4.測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以?xún)?nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，除另有規(guī)定外吸收度最大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以?xún)?nèi)。
5.供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以?xún)?nèi)。
6.選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。
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