一、目的：
建立Varian cary 100型紫外分光光度計標準操作規(guī)程，以保證Varian cary 100型紫外分光光度計的正確使用。
二、范圍：
適用于Varian cary 100型紫外分光光度計操作的全部行為。
三、責任：
中心化驗室對本SOP的實施全面負責。
四、內(nèi)容：
4．1測定前的準備工作
4．1．1接通電源并將電源開關(guān)打開至“ON”位置，依次打開顯示器、打印機及電腦主機進入Windows桌面。
4．1．2將儀器電源開關(guān)打開至“I”位置，儀器開始自檢，自檢完畢后，預熱30分鐘左右再進行測定。
4．2吸收光譜測定
4．2．1參數(shù)設置　在Windows桌面上用鼠標雙擊Cary winUV圖標，進入Cary winUV子菜單選擇Scan圖標并雙擊，進入Scan控制界面。按Setup鍵，屏幕顯示參數(shù)設定條件表，根據(jù)實驗要求，對掃描起始波長和終止波長、測定量程方式、掃描控制參數(shù)、基線控制參數(shù)、是否參照掃描、是否打印參數(shù)等逐項進行設定或改變，待所需參數(shù)均設定好后應檢查1次，以確認所有參數(shù)均已正確設定，按OK鍵。
4．2．2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置，盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號位置，關(guān)緊樣品室門。在Scan控制界面上按Zero鍵調(diào)零，調(diào)零完畢按Start鍵，出現(xiàn)Save AS子菜單，在file name目錄里輸入樣品名，按Save鍵，出現(xiàn)Sample name屏幕，按OK鍵，儀器進行掃描。掃描完畢按Print鍵打印結(jié)果。
4．3單波長數(shù)據(jù)測定
4．3．1參數(shù)設置 在Windows桌面上用鼠標雙擊Cary winUV圖標，進入Cary winUV子菜單選擇Simple Read圖標并雙擊，進入Simple Read控制界面。按Setup鍵，屏幕顯示參數(shù)設定條件表，根據(jù)實驗要求，在Read at Wavelength選項里設定所需波長；在Ave Time（sec）選項里設定讀信號時間；在SWB選項里設定光譜帶寬；在Y Mode選項里設定測定量程方式；以吸收度顯示選ABS等逐項進行設定或改變，待所需參數(shù)均設定好后應檢查1次，以確認所有參數(shù)均已正確設定，按OK鍵。
4．3．2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置，盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號位置，關(guān)緊樣品室門。按Zero鍵調(diào)零，調(diào)零完畢后在Simple  Read控制界面上按Read鍵即自動讀出測定結(jié)果，按Print鍵打印樣品結(jié)果。
 4．4標準曲線測定
4．4．1設置參數(shù) 在Windows桌面上用鼠標雙擊Cary winUV圖標，進入Cary winUV子菜單選擇Concentration圖標并雙擊，進入Concentration控制界面。按Setup鍵，屏幕顯示參數(shù)設定條件表，根據(jù)實驗所需要求，對測定波長設定、對測定光譜帶寬、測定量程方式、曲線建立方法、標準品數(shù)量、標準品濃度、樣品數(shù)量、測量值單位、打印參數(shù)等逐項進行設定或改變，參數(shù)設定完畢，按OK鍵。
4．4．2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置，盛以最低濃度標準品溶液的比色皿放入“2”號位置，按Zero鍵調(diào)零，調(diào)零完畢后，在Concentration控制界面上按Start鍵，進入Standard/Sample Selection控制界面，按OK鍵，出現(xiàn)Save AS子菜單，在file name目錄里輸入標準品名，按Save鍵，出現(xiàn)Present Standard控制界面，按OK鍵。依次放入盛以由低濃度至高濃度的標準品溶液的比色皿至“2”號位置，儀器進行標準曲線測定并分析。
4．4．3標準品測完畢后，換上待測樣品溶液，按OK鍵，儀器將自動讀出測定結(jié)果。按Print鍵打印測定結(jié)果。
4．5樣品加溫功能
樣品如需加溫，則可使用此功能。將加溫控制器電源開關(guān)打開至“I”位置，接通泵的電源并把水泵放入預先裝滿2/3體積水的500ml燒杯里。在加溫控制器的控制屏幕上按UP鍵或DOWN鍵設定所需溫度即可。
4．6關(guān)機
取出比色皿冼凈，依次關(guān)掉電腦主機、顯示器、打印機及儀器電源開關(guān)，拔掉電源插頭。
4．7注意事項
4．7．1比色皿使用完畢，立即用蒸餾水或有機溶液沖洗干凈，并用柔軟清潔的紗布把水漬擦凈，以防表面光潔受損，影響正常使用。
4．7．2使用的比色皿必須潔凈并保持樣品室的潔凈，否則會產(chǎn)生測量誤差。
4．7．3供試品溶液的吸收讀在0.3～0.7之間為宜，在此范圍誤差較小。
4．7．4設定的參數(shù)不恰當易得到不良的結(jié)果或圖譜，如狹縫太寬使吸收值降低，分辨率下降；狹縫太窄則出現(xiàn)過大的噪音，使讀數(shù)不準確。
4．7．5測定時注意樣品室門應關(guān)緊，否則引入過多的雜散光，使吸收度讀數(shù)下降。