VIP標(biāo)識(shí) 上網(wǎng)做生意,首選VIP會(huì)員| 設(shè)為首頁(yè)| 加入桌面| | 手機(jī)版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng),關(guān)注食品安全,探討食品技術(shù)
 

免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):禽IgA提取與純化

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

(一)材料與試劑配制

1.禽膽汁

2.飽和硫酸銨溶液

3.0.01Mol/L pH7.4PBS液

4.0.10Mol/L pH6.4PBS液(0.30Mol/L NaCl)

5. DEAE52-纖維素

(二)操作方法

1.取冷藏的膽汁3Ⅹml,緩慢滴加Ⅹml飽和硫酸銨液,邊加邊攪拌,使成25%飽和硫酸銨液。4℃放置30min。

1. 3 000r/min離心30min,去沉淀。

2. 取上清,加飽和硫酸銨液,使成35%的飽和度,4℃放置30min。

3. 3 000r/min離心30min,棄上清。

4. 取沉淀,加0.85%NaCl液溶解,加飽和硫酸銨溶液,重復(fù)步驟3和4三次。

5. 將沉淀用0.85%NaCl液溶解,裝入透析袋,以0.01Mol/L pH7.4PBS液透析。

6. 以0.01Mol/L pH7.4PBS液平衡,過(guò)DEAE52纖維柱(20×250mm)。

7. 取透析樣品4ml(﹥20mg/ml蛋白濃度)加入層析柱。以0.01Mol/L pH7.4PBS液洗脫。

8. 再用0.10Mol/L pH6.4PBS液(NaCl濃度為0.30Mol/L)洗脫,收集洗脫液。

10.濃縮洗脫蛋白液至20mg/ml,分裝,低溫冰箱保存。

 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專(zhuān)題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專(zhuān)題
點(diǎn)擊排行
 
 
Processed in 0.460 second(s), 19 queries, Memory 0.86 M