（一）蒸汽接種法
準(zhǔn)備：先把接種操作室打掃干凈，保持潮濕清潔。準(zhǔn)備水壺或鋁鍋1只，煤球爐或電爐1只，接種臺(tái)1張，接種針或大鑷子一把。蒸料滅菌桶：用鐵皮做成比鋁鍋口徑小一點(diǎn)的圓桶，桶底放鐵篩架，桶內(nèi)裝菌袋、瓶。上邊口用塑料紙或木蓋封口。
操作：將煤球爐或電爐放在操作臺(tái)旁，再將水壺或鋁鍋放在爐子上面，鍋內(nèi)裝適量的水，接種工具先放在鍋內(nèi)煮沸消毒。接種時(shí)，關(guān)好門窗，洗凈雙手，戴上口罩。將菌種塊直接通過蒸汽放入栽培種的培養(yǎng)料上。在蒸汽上接種，既舒服又方便，且接種質(zhì)量可靠。因?yàn)檎羝谏厦暗倪^程中產(chǎn)生一股沖力，把水壺或鍋上的空氣排開，蒸汽不斷產(chǎn)生，就形成鍋上一片無(wú)菌區(qū)。由于菌種得到蒸汽的濕潤(rùn)，比在酒精燈上接的種恢復(fù)得更快，污染也少。另外蒸汽接種不使用化學(xué)藥品，可避免在接種時(shí)藥品對(duì)入體的毒害。
（二）代替瓊脂培養(yǎng)基
1.綠豆粉培養(yǎng)基：將新鮮、干燥、不霉變的豆粉隊(duì)放入鍋內(nèi)煮沸調(diào)團(tuán)狀，裝入試管或三角瓶?jī)?nèi)，塞好棉塞，用 牛皮紙或報(bào)紙包扎好試管上部，成捆放于高壓鍋內(nèi)，用12公斤／厘米2壓力滅菌半小時(shí)，然后慢慢放汽，取出試管凝固成斜面即成。
2.麥粒種：將小麥粒用溫水浸泡2小時(shí)，撈出放入竹篩內(nèi)，4個(gè)小時(shí)燒一次清水，約24小時(shí)左右，麥粒就萌發(fā) 小芽約1厘米。這時(shí)再放火鍋內(nèi)煮沸半小時(shí)，取出用涼水冷卻后，加入石膏、干馬糞使之成散粒，然后分裝試管、三角瓶、蘑菇瓶、雜酒瓶，裝量按常規(guī)。塞好棉塞進(jìn)行滅菌，15磅壓力滅菌1小時(shí)。然后接種。 采用此法可節(jié)約大量瓊脂。化學(xué)藥品。
（三）于實(shí)體組織分離簡(jiǎn)易方法
在無(wú)菌環(huán)境中，直接切取菇體未形成孢子組織塊，進(jìn)行 培養(yǎng)即稱簡(jiǎn)易分離技術(shù)。
方法：在第一批菇中，選取具有該品種特性的、發(fā)育正常、菌蓋肥厚、朵大、無(wú)病蟲害的子實(shí)體作種菇。在蒸汽上用手把子實(shí)體一分為二，用消毒過的小刀在萌蓋和菌柄交界處切取一小塊菌肉，移放在斜面培養(yǎng)基中央。分離完后標(biāo)上菌種導(dǎo)和分離時(shí)間，然后培養(yǎng)。
還可將于實(shí)體菌柄與菌蓋交界處的菌肉，挑一塊直接放 入滅過菌的原種瓶，培養(yǎng)即可。這種菌種也可直接用于栽培或擴(kuò)接。
（四）以菇種菇的方法
以菇種菇，就是將子實(shí)體直接當(dāng)菌種栽培。方法是：把培養(yǎng)料按常規(guī)栽培要求拌勻后，壓塊，在料塊表面放些子實(shí)體（子實(shí)體要干凈無(wú)污染），子實(shí)體上撒一層培養(yǎng)料，蓋上塑料紙即可。注意子實(shí)體放入后，不能重壓。在20℃以下的低溫培養(yǎng)。
（五）"U"型音提純菌種
常規(guī)提純銀耳伴生菌——香灰菌絲，用試管培養(yǎng)基反復(fù)提純，手續(xù)繁多且不易提純，我們采用玻璃"口"型管提純香灰菌絲，不用瓊脂培養(yǎng)基，就可得到純的香灰菌絲，其方法：取1—2厘米口徑的玻璃"U"型管數(shù)支，裝上木屑培養(yǎng)基，兩端用塑料紙包扎嚴(yán)（耐高壓塑料紙），滅菌后，在接種箱內(nèi)，用接種針挑香灰菌絲前端白色處一點(diǎn)，接于"U"管一端，經(jīng)培養(yǎng)，菌絲長(zhǎng)至另一端后，及時(shí)挑取一點(diǎn)放入又一"U"型管內(nèi)，這樣反復(fù)進(jìn)行提純，可獲得純菌絲。
(六）幾種簡(jiǎn)易母種培養(yǎng)基的制作
1.缺少土豆時(shí)可用米湯或小麥煮水代替
（1）米湯培養(yǎng)基
煮米飯時(shí)在鍋中多加些水；將米湯濾在沒有油污的干凈容器內(nèi)，取1000毫升，倒在小鍋中，加熱煮沸，加入瓊脂20克，攪拌使之溶化，再加入葡萄糖（如無(wú)葡萄糖，加白糖亦可）20克，蛋白胨5克（沒有可不加），維生素B1片（10毫克），待藥物全部溶解后，趁熱倒入漏斗內(nèi)，分裝試管，裝量為試管長(zhǎng)度的 1／4，經(jīng) 15磅壓力滅菌30分鐘，取出；擺成斜面。平菇菌絲在米湯培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速度比在PDA培養(yǎng)基上快1倍左右。
（2）小麥汁培養(yǎng)基
取小麥5斤；淘洗干凈，置鍋中，加水煮沸，煮至小麥膨脹而不裂開，中間無(wú)白心為度，過濾后取澄清液1000毫升（不足量可加清水補(bǔ)充），在濾液中加入瓊脂20克，葡萄糖或白糖20克，制備方法同米湯培養(yǎng)基，過濾后的小麥粒加入0.5％碳酸粉和1.5％的石膏粉，可用于制作原種培養(yǎng)基，在小麥汁培養(yǎng)基上先后接種平菇、鳳尾菇、香菇、木耳、金針菇，其長(zhǎng)勢(shì)均比在PDA培養(yǎng)基強(qiáng)。
2.缺少瓊脂時(shí)可用玉米�；蛎罪堊髋囵B(yǎng)基
（l）玉米粒培養(yǎng)基
將玉米顆粒用冷水泡脹，沖成綠豆粒大小碎塊或?qū)⒛塾衩琢Ｇ兴�，裝入試管，裝量為試管的 1／3～1／2，用竹筷稍壓緊，然后塞上棉塞，置高壓鍋內(nèi)，15磅壓力滅菌45分鐘，取出冷卻后即可作為組織分離或轉(zhuǎn)接菌種的培養(yǎng)基，將組織塊或菌絲接入其中，25℃左右下培養(yǎng)，7～10天菌絲長(zhǎng)滿，菌絲體潔白濃密，擴(kuò)接成原種，長(zhǎng)勢(shì)亦好。
（2）米飯培養(yǎng)基
將已濾去米湯即將入瓶的米飯分裝入試管內(nèi)，稍稍壓緊，使米粒成形，塞上棉塞。滅菌、接種，培養(yǎng)同玉米粒培養(yǎng)基。