1.3 PCR檢測方法的問題及展望
采用PCR技術對食品中致病微生物及轉(zhuǎn)基因成分進行檢測的方法雖然具有特異性強、敏感度高、簡便快速等優(yōu)點,但也存在不少問題。首先就是假陽性結(jié)果的產(chǎn)生。PCR是一種極為靈敏的反應,一旦有極少量外源性DNA污染,就可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果,而樣品間的交叉污染或時間延長也會導致PCR產(chǎn)物的假陽性產(chǎn)生。因而在PCR檢測過程中必須嚴格操作,并設立陰性對照,保證檢測結(jié)果的準確性。第二是引物的問題。目前,PCR引物的合成是該技術普及的最大障礙,有待進一步改善才有希望成為食品微生物常規(guī)檢測技術之一。此外,各種實驗條件控制不當或靶序列的選擇不當?shù)?都可能導致產(chǎn)物突變或降低其靈敏度和特異性。因而,穩(wěn)定性也是PCR技術必須改進的問題之一。之前所述的實時熒光定量PCR法雖然克服了假陽性及定量準確度不高的難題,但是由于熒光定量PCR儀價格昂貴,暫時也難以普遍推廣。因此,如何利用與其他技術的結(jié)合使PCR成為一種穩(wěn)定、靈敏、易操作且成本低廉的技術將是今后研究的主要內(nèi)容之一。

1.4生物芯片技術及其應用
又可稱作DNA微陣列（DNAmicroarray）。生物芯片技術指由按照預定的位置固定在固相載體上很小面積內(nèi)的千萬個核酸分子（CDNA分子、寡核苷酸分子等）所組成的微點陣陣列。首先把樣品中的核酸片段進行標記，在一定條件下，來自樣品的互補核酸片段可以與載體上的核酸分子雜交，在專用的芯片閱讀儀上就可以檢測到雜交信號�；�因芯片技術實際上是高度集成化的反向斑點雜交技術，它解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交自動化程度低、操作復雜、檢測目標分子數(shù)量少、成本高、效率低、結(jié)果客觀性差等問題。但該技術由于芯片制作的復雜、樣品制備和標記復雜，所以在食品微生物檢測中還沒有廣泛的應用，因此在病原微生物檢測中具有很好的發(fā)展前景。

生物芯片可在一次性實驗中檢出多種潛在的致病菌，可以對食品中的致病菌實行高通量的檢測，一次實驗即可得出全部的檢測結(jié)果，操作簡單、快捷、特異性強、敏感性高，全部檢測在幾
小時內(nèi)就可完成。但由于芯片的復雜性，大多數(shù)處于試驗階段，還沒有得到廣泛應用。

1.5生物傳感器檢測技術及其應用
污染食品的微生物種類很多，主要包括細菌、真菌和病毒，其中以細菌最為常見。污染食品的微生物分為腐敗菌和病原菌，腐敗菌本身不致病，主要通過對食品成分的分解和破壞，產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)從而多人體造成危害。而生物傳感器檢測技術能快速檢測微生物如污染食品的病原菌；生物毒素以及其它毒素的檢測。特別是黃曲霉毒素B1（AFB1）是目前所發(fā)現(xiàn)的毒素最強的真菌毒素，通過光纖免疫傳感器來測定花生和玉米粉可得低達0.05μg/L的AFB1。但該技術還未真正用于食品安全檢測。

2.小結(jié)
食品安全檢測中的一個十分重要的內(nèi)容是及時準確地檢測出食品中的病原微生物。傳統(tǒng)的微生物檢測方法雖然有效且特異性高,但存在檢測成本高、速度慢、效率低等問題,難以滿足現(xiàn)代社會快速檢測的要求,并且由于傳統(tǒng)的微生物檢測方法基本上都需要對病原菌進行人工培養(yǎng),對一些生長緩慢或是新的病原菌就難以用傳統(tǒng)方法進行檢測。另外,對近些年來出現(xiàn)的轉(zhuǎn)基因食品中轉(zhuǎn)基因成分的安全檢測也難以用傳統(tǒng)檢測方法進行檢測。而基因探針技術、PCR技術、免疫學技術等作為現(xiàn)代生物學技術手段應用于食品微生物或食品中轉(zhuǎn)基因成分的檢測,克服了傳統(tǒng)食品安全檢測方法的缺點和不足,而且還具有靈敏度高、操作簡便、檢測周期短、檢測成本低等優(yōu)點。DNA探針雜交與PCR聯(lián)合使用檢測食品微生物將是今后食品微生物檢測技術的一個重要研究方向,若能克服兩者存在的易污染產(chǎn)生假陽性結(jié)果的缺失,相信大規(guī)模推廣應用指日可待。而生物芯片技術雖然在目前看來還未真正用于食品安全檢測,但由于它結(jié)合了多門學科中的高新技術,其優(yōu)越性將會日趨明顯,預計也將成為未來食品安全檢測中的生力軍。