四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒:
四環(huán)素檢測試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)而成的檢測產品,能最大限度地減少操作誤差和工作強度。四環(huán)素檢測試劑盒可定性、定量檢測,本試劑盒適用于蜂蜜、牛奶、組織(含水產)中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環(huán)素類藥物的殘留檢測。
一、概要
四環(huán)素類藥物(Tetracyclines,TCs)是以四并苯為母核的一族抗生素,其中四環(huán)素、土霉素、金霉素及多西環(huán)素以其優(yōu)良的抗菌性、穩(wěn)定的藥性及低廉的價格,在畜牧業(yè)生產中廣泛用于疾病的治療和預防及促進生長。但該類藥物過量使用會導致畜產品中高濃度藥物殘留,直接影響消費者身體健康。
高效液相色譜法目前是分析四環(huán)素類藥物殘留量的主要方法,但需要一系列繁瑣的提取和凈化處理步驟,而且存在回收率低,雜質干擾大等問題。
二、試驗原理
四環(huán)素檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被四環(huán)素類藥物抗原,樣本殘留的四環(huán)素類藥物和微孔條上預包被的抗原競爭抗四環(huán)素類藥物抗體,加入酶標二抗,經TMB底物顯色,樣本吸光度值與其殘留物四環(huán)素類藥物呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中四環(huán)素類藥物的含量。
三、交叉反應率
四環(huán)素…………………………………………………100%
強力霉素…………………………………………………100%
金霉素……………………………………………………60%
土霉素………………………………………………………80%
四、檢測方法靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度:0.05ppb
樣本最低檢測限:
蜂蜜………………………………………………………3ppb
牛奶………………………………………………………5ppb
組織(含水產)……………………………………………3ppb
回收率:
蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±15%
組織(含水產)…………………………………………75±15%
精密度:試劑盒的變異系數(shù)均小于10%
五、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到30min(或更長)。反之,則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正,F(xiàn)象,請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
六、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產品有效期為12個月。