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限制酶 restriction enzyme

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-08-11  瀏覽次數(shù):239

  限制酶 restriction enzyme 參與寄主支配性限制的酶。是可識別 DNA的特定堿基排列而切斷鏈的核酸內(nèi)切酶,因此,又稱為核酸內(nèi)切限制酶,目前已從各種細菌類中得到純化的特異性不同的酶。這種酶廣泛存在于生物界,并因生物種屬的不同而其特異性有所不同。因此在酶的名稱上加有生物種屬的簡稱。例如,從流感嗜血桿菌dHaemophilus influenzae d)菌株中分離出的酶稱為Hind限制酶或RHindR為限制的縮寫)。又在同一生物種屬中含有復數(shù)的酶時,則再加上I,I等數(shù)字,從大腸桿菌的B株、K株等分離出來的酶,在反應時,必須有ATP、 S-腺苷蛋氨酸和Mg2 。與此相對應的,從持有耐藥因子的大腸桿菌中分離出的酶(REco RⅠ,Ⅱ)和從嗜血桿菌屬(Haemoph-lius)分離出的酶(RHap, RHind, RHpa等),只需要Mg2 。這些酶決定著切斷部位的堿基排列。雖排列因酶而有所不同,但都是具有雙重旋轉(zhuǎn)對稱性。例如,R·HindⅡ如下圖所示,是在第6個堿基排列的部位按箭頭的位置切斷(A:腺苷,C:胞苷,G:鳥苷,T:胸苷,P:磷酸):另一方面,該菌含有的修飾酶在上面排列的腺苷上(帶*號的)使其甲基化,一旦甲基化后限制酶就不起作用了。通常認為限制酶和修飾酶在結(jié)構(gòu)上是有關(guān)連的,例如,大腸桿菌B株的限制酶是由三個亞基組成,而修飾酶是由其中的二個亞基組成。

 
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