關(guān)于血細(xì)胞分析儀的幾個(gè)問(wèn)題

　　一．發(fā)展簡(jiǎn)史

　　1947年美國(guó)科學(xué)家?guī)鞝柼?W.H.Coulter)發(fā)明了用電阻法計(jì)數(shù)粒子的專(zhuān)利技術(shù)。1956年他又將這一技術(shù)應(yīng)用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得成功，其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮血細(xì)胞在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)為基礎(chǔ)，進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定，這種方法稱(chēng)為電阻法或庫(kù)爾特原理。1962年，我國(guó)第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在上海研制成功。到了60年代未血細(xì)胞分析儀除可進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)外，還可以同時(shí)測(cè)定HGB血紅蛋白。70年代，血小板計(jì)數(shù)儀問(wèn)世。80年代，開(kāi)發(fā)了白細(xì)胞分類(lèi)(3分類(lèi)及5分類(lèi))。90年代，開(kāi)發(fā)出了可對(duì)網(wǎng)狀紅細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的血細(xì)胞分析儀，同時(shí)5分類(lèi)及幼稚細(xì)胞檢測(cè)更成熟，并發(fā)展成為血細(xì)胞分析流水線(xiàn)。

　　二．如何選購(gòu)血細(xì)胞分析儀

　　當(dāng)前，在我國(guó)境內(nèi)銷(xiāo)售的的血細(xì)胞分析儀品牌很多，給醫(yī)院的選購(gòu)造成了一定的麻煩。如日本SYSMEX公司(東亞醫(yī)用電子株式會(huì)社)的血細(xì)胞分析儀系列、美國(guó)庫(kù)爾特公司(現(xiàn)已被貝克曼收購(gòu))的血細(xì)胞分析儀系列、日本光電公司的血細(xì)胞分析儀系列、美國(guó)丹能公司以及瑞典博爾醫(yī)療公司的血細(xì)胞分析儀系列。因此建議醫(yī)院購(gòu)買(mǎi)時(shí)從以下幾個(gè)角度考慮：

　　1.實(shí)用性。醫(yī)院應(yīng)該根據(jù)自身的能力和標(biāo)本量來(lái)決定購(gòu)買(mǎi)何種檔次的機(jī)器，不要盲目攀比，爭(zhēng)相購(gòu)買(mǎi)高檔機(jī)器，從而造成儀器購(gòu)置的浪費(fèi)。

　　2.儀器性能。這是最關(guān)鍵的一個(gè)因素。不能完全相信廠(chǎng)家的宣傳，要多聽(tīng)取專(zhuān)家意見(jiàn)和到友鄰單位了解。 　

　　3.價(jià)格比。衡量同檔次機(jī)器的價(jià)格。

　　4.售后服務(wù)。俗話(huà)說(shuō)：救人如救火。對(duì)機(jī)器也是一樣，機(jī)器損壞待修時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)造成病人對(duì)醫(yī)院的信譽(yù)度下降，久而久之就會(huì)造成病人的流失。所以，機(jī)器的售后服務(wù)也是一個(gè)必須考慮的因素。

　　5.輔助設(shè)備、試劑、消耗品和零配件價(jià)格。

　　要建立請(qǐng)專(zhuān)家進(jìn)行論證的制度，糾正過(guò)去由院長(zhǎng)一人說(shuō)了算的錯(cuò)誤做法。

　　三．如何驗(yàn)收血細(xì)胞分析儀

　　1.驗(yàn)收前準(zhǔn)備工作：仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)；按說(shuō)明書(shū)要求準(zhǔn)備儀器的工作環(huán)境和相關(guān)的外部設(shè)備；成立驗(yàn)收小組；擬定驗(yàn)收計(jì)劃。

　　2.開(kāi)箱：必要時(shí)請(qǐng)商檢局派人參加；開(kāi)箱后按照裝箱單清點(diǎn)物品是否和裝箱單一致。

　　3.安裝：應(yīng)該對(duì)安裝過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)的記錄。

　　4.驗(yàn)收儀器的技術(shù)性能指標(biāo)

　　(1)測(cè)定儀器試劑的本底；

　　(2)檢測(cè)儀器的精密度：用高、中、低值新鮮血標(biāo)本各測(cè)10次，計(jì)算X－S、 CV值，取20～30個(gè)標(biāo)本隨機(jī)排列，各測(cè)3次，求出總重復(fù)性CV%，它代表批內(nèi)精度、儀器穩(wěn)定性、互染等因素的總和；

　　(3)互染率：取高、低兩個(gè)濃度全血(高、低值相差4～5倍)，先測(cè)定高濃度3次，接著測(cè)低濃度3次，再測(cè)高濃度3次，計(jì)算高對(duì)低、低對(duì)高的互染率；

　　(4)線(xiàn)性：取全血標(biāo)本，用鹽水稀釋相當(dāng)于全血的90%、80%、70%……，測(cè)得RBC、WBC、HGB結(jié)果做y=a bx,a接近于0，b接近于1；

　　(5)校準(zhǔn)：應(yīng)由廠(chǎng)家提供全血校準(zhǔn)物(低檔儀器用校準(zhǔn)顆粒及HGB校準(zhǔn)液)進(jìn)行校準(zhǔn)；

　　(6)上述指標(biāo)必須符合該儀器的出廠(chǎng)指標(biāo)，才算驗(yàn)收合格。由驗(yàn)收小組成員、安裝工程師及設(shè)備科同志簽字后存檔。

　　四．如何對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)

　　儀器經(jīng)使用一個(gè)階段后應(yīng)該作一次全面的校準(zhǔn)，因?yàn)閮x器本身是個(gè)比較器。一旦儀器產(chǎn)生漂移將帶來(lái)分析誤差及不精密度，所以?xún)x器應(yīng)該經(jīng)常定期校準(zhǔn)。

　　1．儀器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備：徹底清洗管道，去除管道中的殘留血液、吸附的蛋白和纖維等，然后測(cè)定試劑空白，本底必須符合要求。

　　2．校準(zhǔn)物準(zhǔn)備：檢查校準(zhǔn)物是否在有效期內(nèi)，外觀(guān)有無(wú)變質(zhì)。從冰箱中取出后，必須平衡至室溫，輕輕混勻，小心打開(kāi)瓶蓋，勿使血液濺出，分裝成兩瓶。

　　3．在儀器上測(cè)定校準(zhǔn)物，連續(xù)測(cè)定11次。第1次結(jié)果棄置不用，將2至11次結(jié)果計(jì)算 出 X S，絕對(duì)誤差，相對(duì)誤差。

　　4．核對(duì)實(shí)測(cè)結(jié)果與校準(zhǔn)物所示結(jié)果，檢查實(shí)測(cè)結(jié)果有無(wú)升高或下降的趨向性。

　　5．判斷校準(zhǔn)結(jié)果：校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求如下表1。(1)如果各參數(shù)的絕對(duì)值誤差和相對(duì)誤差小于一級(jí)要求，屬合格范圍，不須作任何校準(zhǔn)。(2)如果參數(shù)大于一級(jí)要求，小于二級(jí)要求，可按說(shuō)明書(shū)要求調(diào)整系數(shù)。當(dāng)調(diào)整后，可再測(cè)定另一瓶全血標(biāo)準(zhǔn)物，理應(yīng)達(dá)到小于一級(jí)要求水平。(3)如果結(jié)果大于二級(jí)要求，則需通知廠(chǎng)家派工程師修理或調(diào)整，為保證病人標(biāo)本測(cè)試質(zhì)量，該儀器應(yīng)暫停使用。

表1 校 準(zhǔn) 標(biāo) 準(zhǔn) 要 求

　　五．使用血細(xì)胞分析儀的注意事項(xiàng)

　　為了保證使用血細(xì)胞分析儀得出的結(jié)果能夠盡量反映病人的真實(shí)情況，在使用時(shí)必須注意以下幾方面：

　　1．血樣：由于靜脈血受外界因素影響較小，成份比較穩(wěn)定，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度高重復(fù)性好，因此除嬰兒外，建議取血者均應(yīng)采用靜脈血。如果采集未梢血時(shí)，注意不可局部過(guò)度擠壓，避免血液中混入大量的組織液，而且易激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生局部凝血，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的誤差；第一滴血由于細(xì)胞成分不穩(wěn)定應(yīng)棄掉，用第二滴血進(jìn)行檢測(cè)。

　　2．抗凝：使用拘櫞酸鹽抗凝劑時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易結(jié)晶，細(xì)胞形態(tài)易發(fā)生變化，影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性；草酸鹽易使血小板產(chǎn)生凝集，并可使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，影響計(jì)數(shù)結(jié)果及分類(lèi)；而肝素抗凝過(guò)量易引起白細(xì)胞凝集和血小板減少；EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低，血小板凝集的可能性大。因此國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)1993年發(fā)表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細(xì)胞分析儀的抗凝劑，用量為1.5～2.2mg/ml血。

　　3．采血后用塞子密閉，室溫保存不超過(guò)6小時(shí)。

　　4．稀釋?zhuān)合♂屍�、吸樣管要�?jīng)過(guò)校準(zhǔn)。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測(cè)定，否則易引起“稀釋性溶血”。

　　5．混勻：檢測(cè)前混勻很重要，如果無(wú)旋轉(zhuǎn)式混勻器應(yīng)顛倒混勻至少8次。

　　6．試劑：血細(xì)胞分析儀對(duì)試劑的要求非常嚴(yán)格，要求有嚴(yán)格的滲透壓標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定的導(dǎo)電率、高標(biāo)準(zhǔn)的純凈度以及對(duì)儀器管道和閥路無(wú)腐蝕作用。因此溶血?jiǎng)�、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠(chǎng)配套產(chǎn)品。

　　7．白細(xì)胞分類(lèi)：首先必須明確，迄今為止，世界上無(wú)論多先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀，進(jìn)行的白細(xì)胞分類(lèi)都只是一種過(guò)篩手段，并不能完全取代人工鏡檢分類(lèi)。要堅(jiān)決糾正有些單位用了血細(xì)胞分析儀就丟掉鏡檢的錯(cuò)誤思想。

　　8．質(zhì)量控制：血液分析必須建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制制度，才能保證結(jié)果的可靠性。

　　六．現(xiàn)代血細(xì)胞分析儀的主要進(jìn)展

　　隨著高科技的引用和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種先進(jìn)的血細(xì)胞分析測(cè)試技術(shù)被應(yīng)用到血細(xì)胞分析儀上。1987年Coulter公司發(fā)明的VCS(Volume，V，體積；Conductivity，C，電導(dǎo)性；Scatter，S，光散射)技術(shù)可使血細(xì)胞未經(jīng)任何處理，在與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測(cè)結(jié)果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細(xì)胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術(shù)聯(lián)合的白細(xì)胞分類(lèi)法。進(jìn)入90年代后，儀器的自動(dòng)化程度增高(達(dá)到120份/小時(shí))；可進(jìn)行多參數(shù)分析(高達(dá)30余項(xiàng))；精密度高(重復(fù)計(jì)數(shù)；保證微孔管清潔；取中段血；運(yùn)動(dòng)流式細(xì)胞計(jì)數(shù)原理；鞘流原理……)；向5分類(lèi)及鑒別幼稚細(xì)胞發(fā)展；準(zhǔn)確度好，全面質(zhì)量管理，保證儀器檢測(cè)可靠性；具有智能化，可對(duì)同一病人診斷的前后進(jìn)行對(duì)比，提出綜合意見(jiàn)，確定診斷方向；更加注意保護(hù)操作人員的安全(SLS-Hb、自動(dòng)混勻、進(jìn)樣、吸樣針內(nèi)外清洗等)；向流水線(xiàn)發(fā)展，將血細(xì)胞分析儀、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、推片、染色機(jī)聯(lián)成流水操作線(xiàn)。

　　最后，再?gòu)?qiáng)調(diào)一下，堅(jiān)決反對(duì)用了血細(xì)胞分析儀后就不進(jìn)行鏡下復(fù)檢和分類(lèi)的錯(cuò)誤傾向。