1．用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌對數(shù)生長期（培養(yǎng)3天）的CTLL-2細胞兩次，每次250×g離心10分鐘，洗去培養(yǎng)液中殘存的IL-2。
2．用臺盼藍（1％ Trypan blue）染色法計數(shù)細胞并決定細胞的活力，用10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液懸浮細胞至1×105/ml。
3．在96孔細胞培養(yǎng)板中每孔加0.1ml倍比稀釋的標準IL-2或待測樣品，每個稀釋度三個復孔，標準IL-2從40 IU/ml稀釋到0.019 IU/ml（8～10個稀釋度），陰性對照孔不加IL-2。
4．每孔加0.1ml細胞懸液，在37℃ 5％ CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時。每孔加10μl（0.5μCi或1.85×104Bq）[3H]脫氧胸苷，繼續(xù)培養(yǎng)4小時。
5．用多頭細胞收集器將細胞收集到玻璃纖維濾紙上，用3％醋酸水溶液濾紙3次，洗去游離的[3H]TdR。將濾紙置液體閃爍瓶中，加入5ml閃爍液。在液體閃爍儀上計數(shù)細胞攝入的同位素活性（每分鐘放射性計數(shù)，cpm），根據(jù)儀器效率換算成dpm（每分鐘衰變數(shù)）。
6．用dpm值對樣品稀釋倍數(shù)作圖。在圖上，標準IL-2的曲線與待測樣品的曲線應當呈平行的S型，說明是同樣的分子反應。比較同樣dpm處的不同稀釋倍數(shù)，決定待測樣品的相應濃度。