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| 食用菌菌種的保藏技術(shù) |
| 來源：遼寧金農(nóng)網(wǎng) |
| 菌種是重要的生物資源，是食用菌生產(chǎn)的重要因素。菌種內(nèi)在質(zhì)量的高低及遺傳性狀的優(yōu)劣決定著食用菌的生產(chǎn)能力，是內(nèi)因。在相同的栽培條件下，良種比一般品種可增產(chǎn)三成以上，甚至成倍增長。但選擇出的優(yōu)良菌種，如果管理不好，就會(huì)引起衰退，污染雜菌，造成減產(chǎn)，因此，保藏菌種和選育菌種具有同樣重要的意義。在生產(chǎn)中由于原種和栽培種數(shù)量大，不易保藏，菌種生產(chǎn)者通常以母種形式保藏食用菌菌種，栽培前再進(jìn)行擴(kuò)接用于生產(chǎn)。菌種通過保藏，控制其生長，使優(yōu)良菌種不衰退，不變異，不死亡，不被雜菌污染，以保證在生產(chǎn)上長期應(yīng)用。 菌種的保藏方法很多，常用的有低溫保藏法、液體石蠟保藏法、麥粒保藏法、鹽水保藏法等多種保藏方法，菇農(nóng)可根據(jù)自身?xiàng)l件加以選擇。有條件的地方，同一菌株最好用幾種方法同時(shí)保藏。 1、斜面低溫保藏法：是菌種保藏最常用的方法。即將菌種在適宜的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)成熟后，放入4—6℃冰箱中保存，一般3—5個(gè)月移植一次。為使菌絲體在培養(yǎng)基上不干、不死，以延長保藏時(shí)間，應(yīng)做到以下幾點(diǎn)。一要使用營養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基，使菌絲體發(fā)育健壯。二要將試管棉塞齊管口處剪平，用礦蠟封嚴(yán)，再包扎一層塑料薄膜，以減少培養(yǎng)基水分的散失，延長保藏時(shí)間。三要加大試管內(nèi)瓊脂培養(yǎng)基的用量，使每管不少于12毫升，適當(dāng)擺長斜面，以延緩水分的損耗。四要在配制保藏培養(yǎng)基時(shí)加入少量緩沖劑，一般加入0.2—0.3％的磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。五要設(shè)置一個(gè)永久性的保藏冰箱，與經(jīng)常取用菌種的冰箱分開使用，不要隨意或過多的打開冰箱，以保持冰箱內(nèi)溫度的穩(wěn)定。六要在菌種培養(yǎng)基干縮到一定程度時(shí)，再取出轉(zhuǎn)接試管，一般應(yīng)每隔一定時(shí)期調(diào)換一次培養(yǎng)基配方，以補(bǔ)充營養(yǎng)、水分，消除菌絲體代謝產(chǎn)物的影響，保持菌種正常的生活能力。 2、石蠟保藏法(即礦物油保藏法)：在菌種斜面上注入一層無菌的液體石蠟，使菌絲體與空氣隔絕，以降低代謝活性，從而達(dá)到保藏的目的。此法一般可保藏2—3年，但最好1—2年移植一次。加了石蠟的菌種，置于室溫下保藏比放在冰箱中保存更好。液體石蠟在使用前，經(jīng)高壓滅菌2—3小時(shí)后，再在40℃烘箱中烤干水分。液體石蠟的裝入量以淹過斜面尖端1厘米為宜，然后塞上棉塞(最好將棉塞齊管口剪平，用礦蠟密封)，放于清潔避光、4—15℃常溫下保存。在保存期間應(yīng)定期檢查，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充滅菌液體石蠟。據(jù)試驗(yàn)，在5—28℃之間保存6年出菇率正常。使用時(shí)，可用接種鏟直接挑取少許菌絲，接種于另一斜面培養(yǎng)基上。剛從液體石蠟菌種中移出的菌絲體，常沾有較多的石蠟，生長較弱，需再轉(zhuǎn)管1次，方能恢復(fù)正常。 3、鹽水保藏法：這是利用擔(dān)子菌在液體振蕩培養(yǎng)時(shí)，形成菌絲體球形顆粒的特性，用液體培養(yǎng)法培養(yǎng)食用菌菌絲球，然后進(jìn)行保藏的一種方法。將液體培養(yǎng)1周左右，挑出菌絲體，加入盛有生理鹽水(0.85克食鹽溶于100毫升水中，高溫高壓滅菌后即成生理鹽水)的試管中，封存后可在常溫下存放2年，不影響菌種的存活和形成子實(shí)體。其方法是：用300毫升的三角瓶，裝入50—60毫升培養(yǎng)液(培養(yǎng)液采用馬鈴薯培養(yǎng)基，但不加瓊脂)，接入新鮮菌種1塊(無菌操作)，在28℃、180轉(zhuǎn)／分的搖床中振蕩培養(yǎng)5—7天。然后用無菌吸管從搖瓶中取出5—6個(gè)菌絲球，置于生理鹽水試管中(普通小試管可裝5毫升生理鹽水)，用棉花塞緊管口，以蠟密封，放在4℃以下或常溫下保藏。使用時(shí)開啟管口，挑出菌絲體，放在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 4、自然基質(zhì)保藏法 (1)麩皮保藏法：水與新鮮麩皮按1：0.8的比例混合拌勻，裝入試管，占管深的2／5，洗凈管壁，加棉塞，121℃滅菌40分鐘，接入白靈菇菌種，24—28℃培養(yǎng)6—8天，菌絲在培養(yǎng)基表面延伸即可。用真空泵抽干試管內(nèi)水分，棉塞上滴加無菌凡士林，置干燥器內(nèi)常溫下保存，2—3年轉(zhuǎn)接1次。 (2)木屑保藏法：按配方(闊葉樹木屑78％，麩皮20％，蔗糖1％，石膏1％，料水比1：0.8)配制培養(yǎng)基，裝入試管中，占管深3／4，121℃滅菌1小時(shí)，接入白靈菇菌絲，24—28℃培養(yǎng)，當(dāng)菌絲長到管深的1／2時(shí)，用接種鉤挑去老接種塊，石蠟溶封管口，包上塑料薄膜，冰箱中或常溫下保存，1—2年轉(zhuǎn)接1次。啟用時(shí)，先將菌種活化培養(yǎng)12—24小時(shí)，再挑取木屑內(nèi)菌絲使用。 (3)麥粒保藏法：取健壯麥粒，淘洗后浸水5小時(shí)(水溫20℃)，撈出稍加晾干，裝入試管，裝量以1／4到1／3為宜，然后滅菌，滅菌后趁熱搖散，放置冷卻，向每支試管內(nèi)接菌絲懸浮液1滴，搖勻，在24—26℃下培養(yǎng)，當(dāng)大多數(shù)麥粒出現(xiàn)稀疏的菌絲體時(shí)，終止培養(yǎng)，保藏在冷涼、干燥處（麥粒含水量下超過25%）。 5、擔(dān)孢子濾紙保藏法：在孢子彈射裝置內(nèi)放數(shù)張小條黑色濾紙，整個(gè)裝置高溫滅菌。采收菌幕將開、八九成熟的白靈菇子實(shí)體，先將菇體浸在0.1％升汞液中殺菌1—2分鐘，用無菌水沖洗掉升汞溶液，再用無菌紗布揩干菇體，將菇體插在孢子彈射裝置內(nèi)的支架上，在22℃下培養(yǎng)2天，孢子即可彈射到濾紙條上，然后將濾紙條卷起，置無菌小試管內(nèi)塞上棉塞，用兩層以上牛皮紙包好試管口，置無菌干燥器中1—2天，除去濾紙條上過剩的水分，放在冰箱中保存。使用時(shí)，剪取一小段濾紙條，刮取上面的擔(dān)孢子，讓孢子萌發(fā)成菌絲體，通過出菇實(shí)驗(yàn)篩選菌種，用于生產(chǎn)。用此法可保藏3年以上。 |
食用菌都具有高蛋白，低脂肪、低膽固醇的特點(diǎn)，含有蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、多種維生素和礦質(zhì)元素等成分