索氏抽提法

1范圍

本法適用于水果、蔬菜及其制品、糧食及糧食制品、肉及肉制品、蛋及蛋制品、水產及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游離態(tài)脂肪含量的測定。

2原理

脂肪易溶于有機溶劑。試樣直接用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸發(fā)除去溶劑，干燥,得到游離態(tài)脂肪的含量。

3試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682-2008規(guī)定的三級水。

3.1 試劑

3.1.1無水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.2石油醚(C_nH_2n+2):沸程為30 ℃~60℃。

3.2 材料

3.2.1石英砂。

3.2.2脫脂棉。

4儀器和設備

4.1索氏抽提器。

4.2恒溫水浴鍋。

4.3分析天平:感量0.001 g和0.0001 g。

4.4電熱鼓風干燥箱。

4.5干燥器:內裝有效干燥劑，如硅膠。

4.6濾紙簡。

4.7 蒸發(fā)皿。

5分析步驟

5.1試樣處理

5.1.1固體試樣 :稱取充分混勻后的試樣2 g~5 g，準確至0.001 g,全部移入濾紙簡內。

5.1.2液體或半固體試樣:稱取混勻后的試樣5g~10 g,準確至0.001 g,置于蒸發(fā)皿中,加入約20g石英砂。于沸水浴上蒸干后,在電熱鼓風干燥箱中于100℃土5℃干燥30min后,取出,研細，全部移入濾紙簡內。蒸發(fā)皿及粘有試樣的玻璃棒,均用沾有乙醚的脫脂棉擦凈,并將棉花放入濾紙簡內。

5.2 抽提

將濾紙簡放入索氏抽提器的抽提簡內,連接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器冷凝管上端加入無水乙醚或石油醚至瓶內容積的三分之二處,于水浴上加熱，使無水乙醚或石油醚不斷回流抽提(6次/h~8次/h),一般抽提6 h~10 h。提取結束時,用磨砂玻璃棒接取1滴提取液,磨砂玻璃棒上無油斑表明提取完畢。

5.3 稱量

取下接收瓶，回收無水乙醚或石油醚,待接收瓶內溶劑剩余1 mL~2 mL時在水浴上蒸干,再于100 ℃士5℃干燥1 h，放干燥器內冷卻0.5 h后稱量。重復以上操作直至恒重(直至兩次稱量的差不超過2 mg)。

6分析結果的表述

試樣中脂肪的含量按式(1)計算:

式中:

X -試樣中脂肪的含量,單位為克每百克(g/100 g)；

m₁-恒重后接收瓶和脂肪的含量,單位為克(g)；

m₀-接收瓶的質量,單位為克(g)；

m₂-試樣的質量,單位為克(g)；

100-換算系數(shù)。

計算結果表示到小數(shù)點后-位。

7精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。

酸水解法

1范圍

本法適用于水果、蔬菜及其制品、糧食及糧食制品、肉及肉制品.蛋及蛋制品、水產及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游離態(tài)脂肪及結合態(tài)脂肪總量的測定。

2原理

食品中的結合態(tài)脂肪必須用強酸使其游離出來,游離出的脂肪易溶于有機溶劑。試樣經(jīng)鹽酸水解后用無水乙醚或石油醚提取,除去溶劑即得游離態(tài)和結合態(tài)脂肪的總含量。

3試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682-2008規(guī)定的三級水。

3.1 試劑

3.1.1 鹽酸(HC1)。

3.1.2 乙醇(C₂H₅OH)。

3.1.3無水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.4 石油醚(C_nH_2n+2):沸程為30 ℃~60℃。

3.1.5碘(I2)。

3.1.6 碘化鉀(KI)。

3.2 試劑的配制

3.2.1 鹽酸溶液(2 mol/L):量取50 mL.鹽酸,加入到250 mL水中,混勻。

3.2.2碘液(0.05 mol/L):稱取6.5 g碘和25 g碘化鉀于少量水中溶解,稀釋至1L。

3.3材料

3.3.1藍色石蕊試紙。

3.3.2脫脂棉。

3.3.3 濾紙:中速。

4儀器和設備

4.1恒溫水浴鍋。

4.2電熱板:滿足 200℃高溫。

4.3錐形瓶。

4.4 分析天平:感量為0.1g和0.001g。

4.5 電熱鼓風干燥箱。

5分析步驟

5.1 試樣酸水解

5.1.1 肉制品

稱取混勻后的試樣3 g~5 g準確至0.001 g,置于錐形瓶(250 mL)中,加入50 mL 2 mol/L鹽酸溶液和數(shù)粒玻璃細珠,蓋上表面皿，于電熱板上加熱至微沸,保持1h，每10min旋轉搖動1次。取下錐形瓶,加入150 mL熱水，混勻,過濾。錐形瓶和表面皿用熱水洗凈,熱水一并過濾。沉淀用熱水洗至中性(用藍色石蕊試紙檢驗,中性時試紙不變色)。將沉淀和濾紙置于大表面皿上,于100℃士5℃干燥箱內干燥1 h,冷卻。

5.1.2 淀粉

根據(jù)總脂肪含量的估計值，稱取混勻后的試樣25 g~50 g，準確至0.1 g，倒人燒杯并加入100 mL水。將100mL鹽酸緩慢加到200mL水中,并將該溶液在電熱板上煮沸后加人樣品液中，加熱此混合液至沸騰并維持5min,停止加熱后,取幾滴混合液于試管中,待冷卻后加入1滴碘液,若無藍色出現(xiàn)，可進行下一步操作。若出現(xiàn)藍色,應繼續(xù)煮沸混合液,并用上述方法不斷地進行檢查,直至確定混合液中不含淀粉為止,再進行下一步操作。

將盛有混合液的燒杯置于水浴鍋(70℃~80℃)中30min,不停地攪拌,以確保溫度均勻,使脂肪析出。用濾紙過濾冷卻后的混合液,并用干濾紙片取出粘附于燒杯內璧的脂肪。為確保定量的準確性，應將沖洗燒杯的水進行過濾。在室溫下用水沖洗沉淀和干濾紙片，直至濾液用藍色石蕊試紙檢驗不變色。將含有沉淀的濾紙和干濾紙片折疊后,放置于大表面皿上,在100℃土5℃的電熱恒溫干燥箱內干燥1h。

5.1.3 其他食品

5.1.3.1固體試樣:稱取約2 g~5 g，準確至0.001 g，置于50 mL，試管內,加入8 mL水,混勻后再加10mL鹽酸。將試管放入70℃~80℃水浴中，每隔5min~10min以玻璃棒攪拌1次,至試樣消化完全為止,約40 min~ 50 min。

5.1.3.2液體試樣:稱取約10 g，準確至0.001 g,置于50 mL試管內,加10 mL鹽酸。其余操作同5.1.3.1。

5.2 抽提

5.2.1 肉制品、淀粉

將干燥后的試樣裝人濾紙簡內。其余抽提步驟同上法5.2。

5.2.2 其他食品

取出試管,加入10 mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移入100 mL具塞量簡中,以25 mL無水乙醚分數(shù)次洗試管,一并倒入量簡中。待無水乙醚全部倒人量簡后,加塞振搖1 min,小心開塞，放出氣體，再塞好,靜置12 min,小心開塞,并用乙醚沖洗塞及量簡口附著的脂肪。靜置10 min~20 min,待上部液體清晰,吸出上清液于已恒重的錐形瓶內,再加5 mL無水乙醚于具塞量簡內，振搖，靜置后,仍將上層乙醚吸出,放人原錐形瓶內。

5.3 稱量

同上5.3。

6分析結果的表述

同上6。

7精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。