標(biāo)準(zhǔn)的做法是將定量菌懸液（1ml、0.5或0.1ml）加到冷卻至50-55度融化的瓊脂培養(yǎng)基中（一般做細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)用營養(yǎng)瓊脂平板,而做真菌菌落計(jì)數(shù)用沙氏平板）中混合后置于孵箱觀察.

 

細(xì)菌平板計(jì)數(shù)法:

    首先我們分別在N個(gè)EP管內(nèi)加入900微升無菌N.S或者緩沖液擬做稀釋液,從標(biāo)本中取出100微升加到第一個(gè)EP內(nèi),則第一EP管內(nèi)細(xì)菌濃度為標(biāo)本的1/10；同法,從第一EP中取出100微升加到第二個(gè)EP內(nèi),則第二EP管內(nèi)細(xì)菌濃度為標(biāo)本的1/100.依此類推,第N個(gè)管為原標(biāo)本濃度的1 /10n,再取合適的梯度100微升鋪皿.培養(yǎng)后,如平皿上菌落數(shù)為10-200就比較正確、容易計(jì)數(shù),那你選擇的濃度梯度就比較好,記數(shù)比較可靠！數(shù)記出來了,可以倒推出你標(biāo)本的濃度.

    如某標(biāo)本未知濃度 其第三個(gè)梯度的計(jì)數(shù)為了18,則標(biāo)本每毫升的細(xì)菌濃度=18×10（因?yàn)槟沅伱笾挥昧说谌��?/10）×100×10

    將一定量的菌液接種在平板表面這是一種簡化的計(jì)數(shù)方法,兩者區(qū)別在操作上一個(gè)麻煩,一個(gè)簡單,在判斷結(jié)果上接種平板表面的,菌量多時(shí)沒有稀釋好容易產(chǎn)生菌落融合在一起生長不易分離現(xiàn)象,致使讀數(shù)困難和不準(zhǔn).混合在一起則菌細(xì)胞分布較均勻,結(jié)果易觀察,當(dāng)然,兩種方法都要對配制好的菌液進(jìn)行系列稀釋,對不同稀釋度的菌懸液進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),然后乘以稀釋倍數(shù)即可得實(shí)際菌細(xì)胞數(shù)量,一般以生長100-300個(gè)菌落平板的為佳.

 

   注:平板計(jì)數(shù)更加快捷方便一些,而且,數(shù)菌的時(shí)候更加方便,如果用混勻計(jì)數(shù)......數(shù)菌的時(shí)候可以看得你眼花！通常,我們認(rèn)為,細(xì)菌數(shù)量在30-300之間是較準(zhǔn)確的,在300以上容易涂布不均使細(xì)菌混在一起,30以下稀釋的時(shí)候誤差太大.

    經(jīng)驗(yàn):涂布的時(shí)候不要嫌累,多涂一會不會有什么壞處,否則,細(xì)菌涂布不均就.......