接種：將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種。

2、接種工具

在實(shí)驗(yàn)室中，用得最多的接種工具是接種環(huán)、接種針。有時(shí)滴管、吸管也可作為接種工具進(jìn)行液體接種。在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時(shí)，需要用到涂布棒。

1．接種針 2.接種環(huán) 3.接種鉤 4.玻璃涂棒 5.接種圈  6.接種鋤  7.小解剖刀

3、微生物檢驗(yàn)常見(jiàn)接種方法

（1）劃線接種法

平板劃線分離法--分區(qū)劃線分離法

①用接種環(huán)先將培養(yǎng)物涂布于平板1區(qū)并作數(shù)次劃線，再在2、3……區(qū)依次劃線；

②每劃完一個(gè)區(qū)域，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿約70度角，并將接種環(huán)滅菌一次，待冷后再劃下一區(qū)域；

③每一區(qū)域的劃線均接觸上一區(qū)域的接種線1～2次，使接種量逐漸減少，以獲得單個(gè)菌落；

④其他操作與上述曲線劃線分離法相同。

（2）斜面接種法

主要用于經(jīng)劃線分離培養(yǎng)所獲得的單個(gè)菌落的移種，以及觀察細(xì)菌的某些培養(yǎng)特征。

以菌種移種為例，其接種方法是：

①取一菌種管和培養(yǎng)基管，置左手食指、中指、無(wú)名指間，拇指壓住兩管底部上側(cè)面，使菌種管位于外側(cè)，培養(yǎng)基管位于內(nèi)側(cè)；

②右手拇指和食指分別旋松兩管棉塞�；鹧鏈缇�接種環(huán)；

③以右手小指與手掌，小指與無(wú)名指分別夾取棉塞（先外管后內(nèi)管），將兩管口迅速通過(guò)火焰1~2次；

④將已滅菌的接種環(huán)伸入菌種管中，從斜面上取菌少許，迅速伸入待接種的培養(yǎng)基管中，在斜面底部向上劃一條直線，然后從底部起向上作曲折連續(xù)劃線，直至斜面上方頂端；

⑤取出接種環(huán)，火焰滅菌管口，塞上棉塞（先塞內(nèi)管）；最后將接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌放好；

⑥做好標(biāo)識(shí)，置35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24小時(shí)。斜面培養(yǎng)一般形成均勻一致的菌苔。一般可觀察表面、透明度、色澤等特征。

（3）涂布接種法 

涂布法接種是一種常用的接種方法，不僅可以用于計(jì)算活菌數(shù)，還可以利用其在平板表面生長(zhǎng)形成菌苔的特點(diǎn)用于檢測(cè)化學(xué)因素對(duì)微生物的抑殺效應(yīng)。

原理：將一定濃度，一定量的待分離菌液移到已凝固的培養(yǎng)基平板上，再用涂布棒快速地將其均勻涂布，使長(zhǎng)出單菌落而達(dá)到分離的目的。

（4）液體接種法（肉湯接種）

①如斜面接種法持好菌種管及培養(yǎng)基管；

②滅菌接種環(huán)，從菌種管取菌，伸入培養(yǎng)基管中，在接近液面的管壁上方輕輕研磨，并沾取少許培養(yǎng)基液體調(diào)和，使細(xì)菌混合于培養(yǎng)基的液體中。液體培養(yǎng)基一般以18~24小時(shí)培養(yǎng)后觀察生長(zhǎng)特征。

肉湯培養(yǎng)可觀察如下幾項(xiàng)：

a.發(fā)育程度：有無(wú)生長(zhǎng)、微弱、中等、旺盛；

b.混濁度：有無(wú)及程度（混、中等、微混、透明）、均勻混濁、有顆粒、絮狀生長(zhǎng)；

c.沉淀：有無(wú)及量多少、性狀（粉狀、顆粒狀、絮狀、沾性）；

d.表面：有無(wú)生長(zhǎng)、性狀（膜狀、環(huán)狀）、菌膜厚薄及表面特征（光滑、顆粒、皺狀）；

e.其他：有無(wú)特殊氣味，色素。如果是糖發(fā)酵培養(yǎng)基則主要觀察是否產(chǎn)酸和有無(wú)氣體。

（5）穿刺接種法（半固體接種）

多用于保存菌種、觀察動(dòng)力及厭氧培養(yǎng)等也可以用于觀察細(xì)菌的某些生化反應(yīng)。

①如斜面接種法持好菌種管及培養(yǎng)基管；

②以滅菌接種針從菌種管取菌，垂直刺入培養(yǎng)基的中心（半固體或一般瓊脂高層）直達(dá)近管底部（但不能完全刺到管底），接種針應(yīng)沿原路退出；

③經(jīng)培養(yǎng)后半固體培養(yǎng)基可觀察到：沿穿刺線生長(zhǎng)，線外的培養(yǎng)基清亮表示細(xì)菌無(wú)動(dòng)力；穿刺線模糊不清，或沿穿刺線向外擴(kuò)散生長(zhǎng)，或整個(gè)培養(yǎng)基混濁表示細(xì)菌有動(dòng)力。