1.增加了OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。 

2.修改了適用范圍； 

3.修改了培養(yǎng)基和試劑； 

4.修改了第一法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌定性檢驗(yàn)增菌液、選擇性培養(yǎng)基、檢驗(yàn)程序、 鑒定方法等； 

5.修改了第二法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌平板計(jì)數(shù)法的樣品接種、菌落計(jì)數(shù)和確認(rèn)、 結(jié)果計(jì)數(shù)、結(jié)果報(bào)告； 

6.修改了第三法 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌MPN計(jì)數(shù)法的樣品接種。 

征求意見稿中第三法范圍刪除了(<100CFU/g)而雜菌含量較高和特別是牛奶、水以及含干擾菌落計(jì)數(shù)的顆粒物質(zhì)的食品的限定表述。

a、增加25~30°C恒溫培養(yǎng)箱，對于冰箱、顯微鏡、生化鑒定等設(shè)備參數(shù)進(jìn)行微調(diào)。

b、由于國際、國外標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，ISO 標(biāo)準(zhǔn)采用了 Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)，分離平板包含 OA 李斯特氏菌顯色平板，征求意見稿參照ISO的方法，對其培養(yǎng)基進(jìn)行調(diào)整，與國際接軌；增菌培養(yǎng)基由原來的“李氏增菌肉湯 LB(LB1,LB2)”改為“Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)”，分離培養(yǎng)基增加 “OA李斯特氏菌顯色平板”。

c、培養(yǎng)基還增加了“無菌磷酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水”，刪除了緩沖蛋白胨水。

檢驗(yàn)程序中除了對于分離培養(yǎng)基進(jìn)行微調(diào)外，還對于生化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的列舉，流程更完整、完善。

a、修改并增加了液態(tài)樣品制備的操作部分，針對固體、半固體及其他樣品采用拍打式和高速旋轉(zhuǎn)式進(jìn)行樣品處理分開描述，更詳細(xì)。

b、征求意見稿中增加了分離時需要混勻的具體要求，并增加了PALCAM 瓊脂平板上菌落大小的描述，更直觀、更具體；新增培養(yǎng)基的菌落特征也很詳細(xì)，并且增加了其他亞菌種的形態(tài)說明。

c、征求意見稿中把純培養(yǎng)的過程單列出來，這樣再進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)的菌落來源更清晰、明確。

d、鑒定實(shí)驗(yàn)步驟中，修改了部分文字描述，使整個的表述更加具體，更加清晰直觀。

a、征求意見稿中不僅修改了稀釋液，還將振搖試管或換用1支1mL無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻的描述刪除了，不再限制混勻的方式，只要充分混勻即可。與第一法一致增加了液態(tài)樣品的樣品制備操作步驟。

b、我國現(xiàn)行有效的與單增李斯特菌限量指標(biāo)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)中，有定量要求的方法僅涉及 GB 29921-2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品中致病菌限量》中的水產(chǎn)制品（僅適用即食生 制動物性水產(chǎn)制品），其要求的檢出限為小于等于 100 CFU/g。吸 0.1 mL 接種 2 塊李斯特氏菌顯色平板方法檢出限已滿足該要求。作為配套的檢測標(biāo)準(zhǔn)，“0.1 mL、0.1 mL 涂布法” 已能滿足現(xiàn)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)需要。同時繼續(xù)保留“0.3mL、0.3mL、0.4mL 涂布法”，滿足檢出限 更低的需求和方法的延續(xù)性。 

c、征求意見稿中新增了操作時間的要求。

結(jié)果計(jì)算與報(bào)告在2016版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了細(xì)化，菌落生長大于和小于100的情況分別給出了相關(guān)要求描述。

征求意見稿征求意見鏈接：https://sppt.cfsa.net.cn:8086/cfsa_aiguo

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