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食品中霉菌檢測常見問題的匯總!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-05-09
核心提示:實驗室霉菌檢測中常見問題霉菌:不是分類學上的名詞,而是一些絲狀真菌的通稱,屬真菌的一部分;其對人類具有雙重性,有利的方面
 
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實驗室霉菌檢測中常見問題

 

霉菌:

不是分類學上的名詞,而是一些絲狀真菌的通稱,屬真菌的一部分;其對人類具有雙重性,有利的方面是它可以用來釀造、工業(yè)發(fā)酵、抗生素和酶制劑的生產(chǎn)等,不利方面是它能引起農(nóng)副產(chǎn)品、食品、原料及器材的腐爛,也感染并引起人類和動、植物的多種疾病,少數(shù)種類,如黃曲霉,能產(chǎn)生黃曲霉毒素,黃曲霉毒素是一種致癌物質(zhì),危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的檢測對于食品的安全性很重要。

食品中常見的霉菌:毛霉屬、根霉屬、曲霉屬、青霉屬等。

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檢測中的注意事項:

1、 取樣的代表性。

2、 取樣工具的無菌。空氣中霉菌的孢子含量很高,所以,取樣的工具、容器等要經(jīng)過嚴格的高壓滅菌。

3、 檢樣的方法。

(1)由于霉菌易被攜帶,所以,檢樣時操作人員應(yīng)盡量避免自身攜帶的可能。

(2)樣品的均質(zhì)及充分振搖。因為有些孢子是連成串的,故均質(zhì)和振搖能使其充分散開,同時,在各梯度連續(xù)稀釋時,也要用滅菌吸管反復吹吸幾次,使孢子充分散開。

4、培養(yǎng)溫度和時間。培養(yǎng)溫度 25-28℃培養(yǎng),5 天后觀察。

霉菌檢驗中常用的培養(yǎng)基:孟加拉紅瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、察氏瓊脂、高鹽察氏瓊脂等。

5、檢樣中常見的問題。

(1) 不同稀釋度計數(shù)結(jié)果不相同;

(2) 不生長或生長很好連成片無法計數(shù);

原因:①稀釋時未經(jīng)反復振搖,吹吸,導致孢子未充分散開,影響了計數(shù)的結(jié)果。

②由于培養(yǎng)基不適宜,PH 值低等,致使生長較慢。

③觀察時間的掌握。真菌生長較慢,故需 5d 后才能觀察出結(jié)果。

微生物操作中常見問題的討論與分析

1、 劃線獲得單個菌落的方法。劃不出單個菌落的原因:

(1) 平板上有過多的水分;

(2) 劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復灼燒;

(3) 多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。

2、 涂布和傾注的區(qū)別:

涂布利于觀察,但由于涂布棒上會帶有少量的菌液,可能影響計數(shù)的準確性;傾注更為準確,但不利于觀察菌落的狀態(tài)。

3、 培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題:

(1)滅菌溫度要嚴格控制,按照要求滅菌,尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高,過高會導致糖分焦化,影響質(zhì)量;

(2)瓊脂培養(yǎng)基不能反復溶化。反復溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分;

(3)培養(yǎng)基不能反復滅菌,反復滅菌也會導致營養(yǎng)成分的破壞;

(4)含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,要搖勻。

4、 平板的保存:

大多數(shù)平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

5、 產(chǎn)品的保存:

(1) 干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。

(2) 亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時,要常溫解凍,避免水浴加熱。

(3) 抗生素類:冷藏保存,溫度過高會導致靈敏度的下降。

(4) 兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。

6、 觀察時間的掌握:

 SN、GB 等標準或培養(yǎng)基的使用說明所述時間進行觀察,時間過短或時間過長,單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),時間長綿羊李氏菌也會產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此,時間過長,李氏菌使整個平板成黑色,不利于觀察單個菌落。

7、 添加劑的添加:

(1)溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。

(2)定量。過多會抑制一些目標菌,太少又導致雜菌的過度生長。

8、 培養(yǎng)溫度的掌握:

(1)真菌類。25-28℃培養(yǎng)

(2)細菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在 30℃左右。

(3)其他一般在 36℃左右。

9、 接種方法:

常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

10、革蘭氏染色方法:

染色時間的掌握、沖洗的方法。

11、生化實驗:

(1)接種的方法

(2)氧化型和發(fā)酵型實驗操作

(3)陽性菌種的對照

(4)接種前的純化。挑取單個菌落進行一系列的生化。

12、關(guān)于殺菌的幾個概念:

(1)抑制:是在亞抑制劑量因子作用下導致微生物生長停止,但在移去這些因子后生長仍可以恢復的生物學現(xiàn)象。

(2)死亡:在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長時間的作用下,導致微生物生長能力不可逆喪失,即使移去這種因子后生長仍不能恢復的生物學現(xiàn)象。

(3)防腐:在某些化學物質(zhì)或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生長的一種措施,它能防止食物腐敗或防止食物霉變。

(4)消毒:利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施,它可以起到防止感染和傳播的作用。

(5)滅菌:利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有病原微生物的一種措施。

編輯:songjiajie2010

 
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