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【微生物】浮游菌檢測標準操作規(guī)程!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-02-15
核心提示:1. 取樣前準備工作1.1 依據檢測區(qū)域的取樣點數,按照《培養(yǎng)基配制、滅菌標準操作程序》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。1.2 在超凈工作
 1. 取樣前準備工作

 

1.1 依據檢測區(qū)域的取樣點數,按照《培養(yǎng)基配制、滅菌標準操作程序》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
1.2 在超凈工作臺內,以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15mL的裝量分裝,待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。
1.3 將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內于30~35℃培養(yǎng)48小時。取出逐個檢查,確認無菌落數后即可使用。
1.4 采樣:將上述制備好的營養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣。

2. 儀器、設備和培養(yǎng)基

2.1 所用的儀器、設備和培養(yǎng)基
2.1.2 浮游菌采樣器
2.1.3 培養(yǎng)皿(φ90mm×15mm)
2.1.4 培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)
2.1.5 恒溫培養(yǎng)箱

2.2  儀器、設備、培養(yǎng)基的要求
浮游菌采樣器
2.2.1 浮游菌采樣器必須要有流量計和定時器。
2.2.2 應嚴格按儀器說明書的要求進行操作。
2.2.3 采樣器必須按儀器的檢定周期,定期對儀器作檢定,以保證測試數據的可靠性,檢驗項目有:定時器,轉盤轉速,流量計。
2.2.4 每次測試前應先接通電源,啟動真空抽氣泵,然后調節(jié)流量計和定時器。
2.2.5 空氣采樣量根據需要選定,已知采樣器的流量(L/min),設定采樣時間(min)兩者相乘即得采樣量(L)。
2.2.6 采樣口必須用便于消毒及化學性能穩(wěn)定的材料制造,采樣管嚴禁滲漏,內壁應光滑,采樣管的長度應根據測定點的高度定,盡量減少彎曲。

3. 測試方法

3.1  測試用儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。
3.1.1  采樣器進入被測房間前先用消毒劑滅菌。
3.1.2  用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
3.1.3  采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂盤、轉盤以及罩子的內外面,采樣結束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。
3.1.4  采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌,如用消毒劑對采樣管的外壁、內壁進行消毒,應將管中的殘留液倒掉并晾干。
3.1.5  采樣者應穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服,在轉盤上放入或調換培養(yǎng)皿前,雙手用消毒劑消毒。

3.2  采樣程序
3.2.1  儀器經消毒后先不放入培養(yǎng)皿,開動真空泵抽氣,使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā),時間不少于5min,并調好流量、轉盤轉速。
3.2.2  關閉真空泵,放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調節(jié)采樣品縫隙高度。
3.2.3  置采樣器于采樣點后,開啟采樣器、轉動定時器,根據采樣量設定采樣時間。

4. 測試規(guī)則

4.1 測試狀態(tài)
4.1.1  浮游菌測試前微生物限度檢查室已經消毒過。
4.1.2  測試狀態(tài)為靜態(tài)測試,并在報告中注明測試狀態(tài)。

4.2 測試人員
4.2.1  測試人員必須穿戴符和被測環(huán)境級別的工作服。
4.2.2  靜態(tài)測試時,室內人員不得多于2人。

4.3 測試時間
4.3.1  對單向流,測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始。
4.3.2  對非單向流,測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于30min后開始。

4.4  最少采樣點數目及其布置,最小采樣量,見下表:

 

4.4.1  工作區(qū)測點位置離地0.8m~1.5m左右,送風口測點位置離開送風面30cm左右;可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。
4.4.2  每個采樣點一般采樣一次。
4.4.3  對于單向流或送風口,采樣器采樣管口朝向應正對氣流方向;對于非單向流,采樣管口向上。
4.4.4  布置采樣點時,至少應離開塵粒較集中的回風口1m以上。
4.4.5  采樣時,測試人員應站在采樣口的下風側。

5. 培養(yǎng)
取樣結束后將平皿復倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內于30~35℃培養(yǎng)48小時。并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對照皿。

6. 菌落計數

6.1 用肉眼直接計數,然后用5-10倍放大鏡檢查,是否遺漏。
6.2 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊,可分辨時,仍以2個或2個以上的菌落計數。計數:培養(yǎng)結束,將上述培養(yǎng)后的平皿取出,逐個點計菌落數,必要時用放大鏡檢查,并記錄。 

7. 結果計算

7.1 平均菌落數的計算見下式:

 

式中:m 為該房間(或區(qū)域)的平均菌落數;
          m1、m2‥‥‥mn 為該房間(或區(qū)域)各取樣點的菌落數;
          N 為培養(yǎng)皿總數。

8. 結論

8.1 潔凈室(區(qū))內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準。
8.2 若某潔凈室(區(qū))的平均菌落數超過評定標準,則必須對此區(qū)域先行消毒,然后重新測試兩次,測試結果必須合格。

 

編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 操作規(guī)程 標準
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