GB/T 4789.3-2003 大腸菌群測(cè)定

03版只有一個(gè)方法：MPN法，也有人叫九管法。

陽(yáng)性的方法步驟：

制樣→接種到乳糖膽鹽發(fā)酵管→伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基→乳糖發(fā)酵管（同時(shí)做革蘭氏染色）→看表計(jì)算。

其實(shí)這個(gè)方法比較簡(jiǎn)單的一個(gè)方法，也是常說的半定量的方法。

我們下面說一下這個(gè)方法的注意事項(xiàng)。

第一，這個(gè)方法是一個(gè)半定量的方法，最不好要用于測(cè)量審核上。

第二，做實(shí)驗(yàn)前要注意導(dǎo)管里是否有空氣（最好使用大直徑的小導(dǎo)管），以免影響結(jié)果的判斷，增加工作量。

第三，經(jīng)常有人會(huì)無視標(biāo)準(zhǔn)有一個(gè)糞大腸的檢測(cè)步驟。這個(gè)很少人會(huì)去做。

第四，對(duì)伊紅美藍(lán)的陽(yáng)性現(xiàn)象不了解（其實(shí)實(shí)驗(yàn)室可以在做出陽(yáng)性結(jié)果之后，將菌接出來，以后用來做人員培訓(xùn)）。

第五，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)是否還在實(shí)行不清楚，很多人在16版出來的時(shí)候，都在問03版是不是也作廢了，其實(shí)并沒有。03版目前還在執(zhí)行著（畢竟還有些標(biāo)準(zhǔn)還在用著它的單位）。

GB 4789.3-2016  大腸菌群計(jì)數(shù)

這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)里有兩個(gè)方法：MPN法和平板計(jì)算。

首先說MPN法，它相對(duì)于03版的MPN有一定的區(qū)別。第一這兩個(gè)方法用的培養(yǎng)基完全不一樣。第二16版的方法沒有伊紅美藍(lán)畫線，這樣的過程減少了一步相對(duì)簡(jiǎn)單一點(diǎn)。第三單位變了。

平板法：其實(shí)平板是我們目前用得最多的一個(gè)方法，步驟看標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)流程圖。

那么平板法有什么注意的呢？

第一，做平板法的時(shí)候需要覆蓋第二層培養(yǎng)基，它的作用是：有助于典型菌落形成也為了防止蔓延性細(xì)菌生長(zhǎng)。

第二，挑菌，其實(shí)這一步主要怕挑菌的時(shí)候挑不到菌，其實(shí)你可以把帶菌的部分培養(yǎng)基完全挑起來（不要怕培養(yǎng)基包含著它出不來）放到BGLB內(nèi)，然后用手腕力搖一下試管就可以把培養(yǎng)基打碎。

第三，計(jì)算問題，標(biāo)準(zhǔn)挑取10個(gè)典型菌落。然后計(jì)算比例再乘以所有典型菌落的數(shù)（有人會(huì)在這里糾結(jié)，覺得不太準(zhǔn)確，應(yīng)該所有菌落都挑取）其實(shí)這個(gè)一個(gè)想法很好，但是這樣之后增加工作量的同時(shí)影響效率。其實(shí)在平板上你應(yīng)該區(qū)分典型菌落出來去做就可以（當(dāng)然這步要考驗(yàn)一個(gè)人的眼力和經(jīng)驗(yàn)）初學(xué)者可以根據(jù)形態(tài)進(jìn)行分類，然后以形態(tài)特征進(jìn)行驗(yàn)證。

兩個(gè)版本的一些檢測(cè)方法和注意事項(xiàng)都說了，那么我們說一下一些朋友常問的一些問題。

1. 03版的結(jié)果能不能和10版的結(jié)果進(jìn)行換算和比較。

答：其實(shí)換算是不行的，這個(gè)兩個(gè)不同的標(biāo)準(zhǔn)。如果只是進(jìn)行比較兩個(gè)結(jié)果是可以的，但是不建議。

2.如何選擇檢測(cè)方法？

答：你要根據(jù)產(chǎn)品的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)去選擇檢測(cè)方法，不是說你喜歡那種就可以用那種。

3、同一批產(chǎn)品，檢測(cè)的兩份結(jié)果不一樣，是不是那里出問題？

答：其實(shí)不是出問題，這個(gè)是正常的，同一批產(chǎn)品不代表他們的微生物檢測(cè)結(jié)果是一模一樣的，如果是這樣也沒必要做五份去驗(yàn)證產(chǎn)品合格了吧？如果說同一份樣品（制成一份樣）出現(xiàn)結(jié)果差好遠(yuǎn)的話，這里就要去分析那里出問題。

好像就這些問題比較常見。